Оглавление
- Проблематика этапа подбора ПС
- Кровяной анар
- Агар Эндо
- Агар Мак Конки
- Агар Сабуро
- ЖСАМ
- Энтерококковый Агар
Проблематика этапа подбора ПС
Подбор питательных сред — один из самых недооценённых, но ключевых этапов в медицинской микробиологии. Об этом редко говорят в университетских курсах: студентам дают классификацию и список сред, но не учат главному — как выбрать нужную комбинацию для реального биоматериала. На практике именно от выбора среды зависит, выделим мы возбудителя или нет. Одни микроорганизмы быстро «теряются» в обилии сопутствующей флоры, другие требуют особых условий, третьи проявляют себя только на диагностических средах. Ошибся с подбором — и пациент может остаться без точного диагноза. Моя многолетняя практика показывает: важно не просто «посеять», а сразу заложить стратегию выделения и идентификации микроорганизма. Для этого используют оптимальный набор сред, который:
- обеспечивает рост максимально широкого спектра бактерий из биоматериала,
- позволяет подавить сопутствующую флору и «подсветить» клинически значимые микробы,
- помогает сразу получить дифференциальные признаки для первичной идентификации патогена.
В этой статье я собрал ТОП важнейших сред для медицинской микробиологии — тех, которые реально работают в клинической практике, а не только в учебниках. Это концентрат опыта, который обычно приходит после многих лет работы «в поле».
Кровяной агар (КА)
- Универсальная обогащённая среда.
- Оценка гемолиза (α, β, γ).
- Поддерживает рост самых требовательных микроорганизмов.
- Приготовление: к основе (МПА или специальная сухая основа) добавляют 5 % дефибринированной крови (чаще бараней или лошадиной). Важно, чтобы кровь была свежей и не свернулась! Готовая среда красно-алого цвета.
Развернуто:
Кровяной агар — это золотой стандарт в медицинской микробиологии. На нём растёт наиболее широкий спектр бактерий, включая такие прихотливые виды, которые не развиваются на других средах: Neisseria, Corynebacterium, Bordetella. Помимо них, уверенно растут Streptococcus, Staphylococcus, Enterococcus, Listeria, Bacillus. Диагностически ценен учёт гемолиза: β-гемолиз характерен для S. pyogenes, α-гемолиз — для S. pneumoniae, отсутствие гемолиза (γ) — для Enterococcus faecalis.
- Агар Эндо
- Селективно-дифференциальная среда для энтеробактерий.
- Основа — ферментация лактозы, колонии приобретают различный цвет.
- Подавляет рост грамположительных бактерий.
- Ключевые компоненты: пептон, лактоза, основной фуксин, сульфит натрия (ингибитор грамположительных).
Развернуто:
Эндо широко применяется при диагностике кишечных инфекций. Он избирателен для грамотрицательных бактерий семейства Enterobacteriaceae. Escherichia coli образует яркие малиновые колонии с металлическим блеском, Salmonella и Shigella дают бледные бесцветные колонии. Также растут Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter. Среда удобна для первичной дифференциации лактозоположительных и лактозоотрицательных штаммов в посевах кала и мочи.
- Агар МакКонки
- Аналог Эндо, но мягче по селективности.
- Дифференцирует лактозоферментирующие и нелактозоферментирующие бактерии.
- Подходит для энтеробактерий и внекишечных грамотрицательных.
- Ключевые компоненты: пептоны, лактоза, соли жёлчных кислот, кристаллвиолет (ингибитор грамположительных), нейтральный красный (индикатор).
Развернуто:
На агаре МакКонки хорошо растут не только кишечные энтеробактерии (E. coli, Klebsiella, Enterobacter, Salmonella, Shigella), но и внекишечные грамотрицательные возбудители (Pseudomonas, Acinetobacter). Лактозоположительные бактерии дают красные колонии, лактозоотрицательные остаются бледными. Среда часто используется для диагностики инфекций мочевыводящих путей, пневмоний и госпитальных инфекций, вызванных грамотрицательной флорой.
- Агар Сабуро
- Специальная среда для грибов.
- Низкий рН и антибиотики подавляют рост бактерий.
- Поддерживает рост дрожжеподобных и плесневых грибов.
- Ключевые компоненты: сухая основа (пептон + глюкоза + агар), рН ~ 5,6; часто добавляют антибиотики (хлорамфеникол, стрептомицин).
Развернуто:
Агар Сабуро — базовая среда медицинской микологии. На ней растут дрожжеподобные грибы (Candida albicans, Candida glabrata), дерматофиты (Trichophyton, Microsporum, Epidermophyton) и плесневые грибы (Aspergillus, Penicillium). Благодаря кислой реакции и добавлению антибиотиков подавляется рост бактериальной флоры, что делает Сабуро оптимальной для выделения грибов из мазков, соскобов, ногтей и других материалов.
- Желточно-солевой агар с мальтозой (ЖСАМ)
- Селективная среда для стафилококков.
- Высокая концентрация NaCl подавляет рост сопутствующей флоры.
- Учитывается лецитиназная активность (помутнение/опалесценция вокруг колоний).
- Ферментация мальтозы → изменение окраски.
- Ключевые компоненты: сухая основа (мясо-пептонный агар с 7,5 % NaCl) + яичный желток (добавляется в лаборатории) + мальтоза + индикатор.
Развернуто:
ЖСАМ используется для выделения и дифференциации стафилококков, в т.ч. Staphylococcus aureus. Соль создаёт селективные условия, яичный желток позволяет выявлять продукцию фермента лецитиназы (S. aureus даёт характерные зоны помутнения), а ферментация мальтозы проявляется изменением цвета колоний. На среде могут расти и сапрофитные стафилококки (S. epidermidis), но именно патогенные штаммы дают сочетание положительных признаков.
Энтерококковый агар (с азидом)
- Селективная среда для выделения и идентификации энтерококков.
- Подавляет рост большинства сопутствующих микроорганизмов.
- Учитывает ферментацию углеводов и образование характерных колоний.
- Ключевые компоненты: пептон, глюкоза, 0,04 % азид натрия (ингибирует цитохромсодержащие бактерии), индикаторы pH (например, бромкрезоловый пурпурный или т. п.).
Развернуто:
Эта среда селективно стимулирует рост Enterococcus faecalis, E. faecium, E. durans, E. hirae. Азид натрия блокирует дыхательные ферменты у большинства грамположительных и грамотрицательных бактерий, но не у энтерококков (они обходятся без полноценной цитохромной системы). В результате на агаре растут почти исключительно энтерококки. Колонии Enterococcus faecalis часто приобретают темно-фиолетовый цвет, , E. Faecium более светлые.
Диагностическая ценность:
Энтерококки — важные возбудители ИМП, эндокардитов, нозокомиальных инфекций. Их раннее выделение критично, так как они устойчивы к многим антибиотикам. Энтерококковый агар позволяет достоверно их обнаружить в биоматериале с богатой сопутствующей флорой.
Что дает использование ТОПа сред?
Итак, использование набора ключевых питательных сред — Кровяного агара, Эндо/МакКонки, ЖСАМ, Сабуро и Энтерококкового агара — позволяет в рутинной практике диагностировать до 90 % клинически значимых микроорганизмов.
- Выделение в чистую культуру. Сразу после посева мы получаем изолированные колонии возбудителей, у которых можно определять чувствительность к антибиотикам.
- Одноэтапная идентификация. Уже на этапе первичного выделения можно уверенно распознать целый ряд патогенов: Staphylococcus aureus, Escherichia coli, энтерококки, дрожжи рода Candida.
- Экономия времени. Нет необходимости в многоступенчатых посевах и пересевах: выделение и диагностика совмещаются.
- Доступность. Все перечисленные среды выпускаются в России, они относительно недорогие и легко доступны в практике лабораторий
Таким образом, мы получаем рабочую схему «одним шагом» — выделение + предварительная идентификация. Это позволяет лаборатории быстрее выйти на постановку антибиотикограммы или дополнительных биохимических тестов, а врачу — быстрее получить клинически значимый результат.
📌 Такой подход — это не «роскошь крупных центров», а реальный инструмент любой микробиологической лаборатории, который работает здесь и сейчас.
Таблица базовых сред
|
Среда
|
Ключевые компоненты
|
Основные микроорганизмы
|
Диагностическая ценность
|
|---|---|---|---|
|
Enterococcus faecalis, E. faecium, E. durans, E. hirae
|
РОМАНА ОВЧИННИКОВА
Курс по практической микробиологии для начинающих специалистов
Анонсы статей
