Оглавление
- Подготовка питательных сред
- Стерилизация
Хранение и срок годности
Стабильность состава
- Можно ли использовать просроченные среды?
- Вывод
Питательные среды — это основа работы клинической микробиологической лаборатории. Их качество напрямую определяет результаты выделения и идентификации возбудителей. Поэтому важно понимать, как правильно готовить, стерилизовать и хранить среды, чтобы сохранялась их диагностическая ценность.
1. Подготовка питательных сред
- В лаборатории чаще всего используют сухие основы, выпускаемые промышленностью. Это удобно: состав стандартизирован, а лаборант лишь разводит порошок в воде и доводит рН.
- Некоторые среды требуют доработки перед использованием. Например: в кровяной агар добавляют 5 % дефибринированной крови, в желточно-солевой агар — яичный желток.
- Важно тщательно растворять основу и перемешивать, избегая комков и нерастворённых фрагментов — это влияет на равномерность роста колоний.
- Стерилизация
- Большинство сред стерилизуют в автоклаве (121 °C, 15–20 мин). Это надёжный метод, который уничтожает споры и вегетативные формы микроорганизмов.
- Исключение составляют термолабильные компоненты (кровь, антибиотики, желток) — их добавляют асептически после автоклавирования и охлаждения основы (обычно до 45–50 °C).
- Никогда не перегревайте среды: это может изменить рН и разрушить индикаторы, углеводы и другие чувствительные вещества.
- Хранение и срок годности
- Стерильные готовые среды обычно разливают в чашки Петри или пробирки и хранят в холодильнике при +4 °C.
- Срок годности зависит от состава:
- простые среды (например, МПА) — 1–2 месяца;
- обогащённые среды (КА, ЖСА) — обычно не более 2–3 недель;
- селективные среды с антибиотиками (Сабуро с хлорамфениколом, МакКонки) — 1–2 недели, так как активность добавок снижается.
- Перед использованием обязательно проверяют: нет ли пересушивания, трещин, изменения цвета или контаминации.
- Стабильность состава
- Со временем некоторые среды теряют селективность или индикаторные свойства. Например, красители обесцвечиваются, антибиотики разрушаются, кровь в КА буреет.
- Поэтому важно соблюдать ротацию запасов: использовать свежеприготовленные среды в первую очередь.
- Недопустимо повторное замораживание/размораживание сред и длительное хранение при комнатной температуре.
- Можно ли использовать просроченные среды?
Использование просроченных питательных сред категорически не рекомендуется. Даже если среда внешне выглядит нормально, её свойства уже могут быть нарушены:
- снижается питательная ценность,
- разрушаются антибиотики, красители и индикаторы,
- меняется рН и влажность,
- возрастает риск скрытой контаминации.
Последствие: возбудитель может не вырасти, дать атипичную колонию или не проявить свойственные ему ферментативные реакции. Это приведёт к диагностической ошибке.
📌 В учебных целях (например, для демонстрации морфологии колоний на практикуме) просроченные среды иногда используют, но никогда не для клинической диагностики.
Вывод
Знание и соблюдение правил подготовки и хранения питательных сред — это не формальность, а практический навык, от которого зависит успех диагностики.
Даже самая точная методика посева не принесёт результата, если среда пересушена, потеряла селективность или использована после истечения срока годности. Поэтому профессиональная лабораторная практика всегда строится на свежих и качественных средах.
РОМАНА ОВЧИННИКОВА
Курс по практической микробиологии для начинающих специалистов
Анонсы статей
